技术服务
首页 > 技术服务


单克隆抗体制备
  详细资料
单克隆抗体则是由一个产生抗体的细胞与一个骨髓瘤细胞融合而形成的杂交廇细胞经无性繁殖而来的细胞群所产生的,所以它的免疫球蛋白属同一类型,质地纯一,而且它是针对某一抗原决定簇的,因此特异性强,亲合性也一致。1975年Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞与和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交瘤细胞既可产生抗体,又可无性繁殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。
(1)服务流程
1)免疫和ELISA检测:客户提供的蛋白质或多肽与载体蛋白(如KLH)偶联。需要约4 mg蛋白质免疫原或5-10 mg的多肽,免疫5只Balb/c小鼠,采血用ELISA进行检测。
2)融合和筛选:用小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,得到的杂交瘤细胞通过增殖和ELISA筛选得到高效价的克隆。
3)亚克隆和交付的结果:挑选两个最好的克隆进行亚克隆和亚型鉴定,交付结果包括1个单克隆细胞株及纯化抗体2 mg。
(2)您需要提供
应提供抗原的相关参数,如分子量、来源、稳定性、储存方法等,提供符合技术要求数量足够的抗原,
1)如果是蛋白抗原>10mg蛋白(SDS-PAGE纯度大于85%),
2)如果是多肽抗原>10mg(要求纯度大于95%);
3)如果是cDNA克隆,提供目的蛋白名称、种属来源、序列、NCBI号;含有目的蛋白全长cDNA的克隆
(3)我们提供
1个单克隆细胞株及纯化抗体2 mg,抗体对免疫原的ELISA效价大于1:80000
(4)质量保证
1)经多次克隆化保证细胞为单克隆,且连续两次克隆化所检测亚克隆的阳性率为100%。
2)选取1~2个最好的克隆,生产腹水,并可根据客户要求进行抗体纯化