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荧光定量PCR
  详细资料
实时荧光定量PCR技术(Real Time Quantitative PCR)于1996年推出。该技术实现了PCR从定性到定量的飞跃,可对目标DNA分子起始拷贝数精确定量。因其检测方法精确、灵敏、污染途径少,已成为国际公认的核酸分子定量的标准方法,应用到多种研究中,如药物处理前后细胞mRNA表达量变化、不同组织mRNA表达量差异、基因芯片结果验证、RNAi效果确认(SiRNA筛选),病毒、病原菌等致病微生物拷贝数定量及各种生物制品食品安全鉴定。
作为一种新型的PCR技术,Real-Time PCR技术将荧光信号强弱与PCR扩增情况结合在一起,与通过监测PCR反应管内荧光信号的变化来实时观测PCR反应进行的情况,解决了传统PCR难以对扩增起始模板的量进行测定的难题,并具有快速、避免交叉污染等特点。
(1)服务流程
1)根据基因序列设计特异性的引物和荧光探针
2)提取DNA/RNA
3)以DNA为模板,对目的基因进行荧光定量PCR检测分析
4)提供实验分析结果
(2)您需要提供
1)提供新鲜的且尽量多的材料,或直接提供纯化好的总RNA(大于5 ug/样品);
2)提供已知的全长基因序列
3)提供尽可能详细的背景资料:DNA/ RNA来源、丰度等
(3)我们提供
提供完整的定量分析结果、实验荧光定量扩增曲线、熔解曲线及详细的实验步骤
(4)质量保证
1)严格进行PCR优化,利用熔解曲线分析保证产物的特异性
2)针对每个样品目的基因的荧光定量 PCR均进行三孔平行实验,保证实验结果的准确性。